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Listar por autor "Estupiñán Torres, Sandra Mónica"

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    • Caracterización bioquímica de Bacillus Thuringiensis Serovar Coreanensis 4al1 (t25001) en relación a su actividad hacia células cáncerigenas 

      Becerra Manrique, Ana María (Universidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá, D.C.Bacteriología y Laboratorio Clínico, 2020-06-02)
      Las proteínas parasporina (PS) son sintetizadas en la fase de esporulación de Bacillus thuringiensis (Bt), una bacteria Gram positiva ampliamente estudiada por actividad insecticida debida a sus toxinas altamente específicas ...
    • Determinación de la actividad antibacteriana de péptidos derivados de la secuencia rrwqwr de lactoferricina bovina 

      Grueso Mariaca, Derly Yesenia (Universidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá, Distrito CapitalBacteriología y Laboratorio Clínico, 2019-11)
      La resistencia antibacteriana es un problema de salud pública y como posible solución, se han estudiado los péptidos antimicrobianos (PAMs) ya que estos, generan menos resistencia que los antibióticos convencionales. La ...
    • Determinación de mecanismos de acción de péptidos frente a bacterias: revisión del estado del arte de las metodologías empleadas 

      Díaz Rodríguez, Karen Tatiana (Universidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotáBacteriología y Laboratorio Clínico, 2022)
      En la última década, se ha trabajado en el hallazgo de nuevas moléculas peptídicas con actividad antibacteriana frente a microorganismos de importancia clínica actual, como lo son aquellos del grupo ESKAPE (Escherichia ...
    • Diagnóstico bacteriológico de la calidad del agua en la zona norte del Humedal La Vaca, Bogotá D.C, en dos épocas climáticas. 

      Arévalo Rodríguez, Karen Lizeth; Argoty Hernández, Diana Lisset; Copete Palomino, Yennifer Paola (Universidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá DCBacteriología y Laboratorio Clínico, 2019)
      Los humedales son ecosistemas fundamentales, ya que son cuna de diversidad biológica, reducen las inundaciones y son grandes depósitos de carbono del planeta. El humedal La Vaca está ubicado en la localidad de Kennedy - ...
    • Estudio de pseudomonas extremaustralis CMPUJ U515, Bacillus Subtilis ATCC 6633 y Bacillus Thuringiensis Kurstaki HD-1 en relación a estrés: Xenobióticos y Glifosfato 

      Beltrán Duque, María Angie (Universidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.C.Bacteriología y Laboratorio Clínico, 2020-05)
      Los xenobióticos son compuestos químicos no son naturales como fertilizantes, pesticidas, tintes, dioxinas, bifenilos policlorados o hidrocarburos poliaromáticos; contaminantes, afectan a los seres vivos porque no hacen ...
    • Evaluación de la actividad antibacteriana de péptidos sintéticos análogos de la buforina II contra escherichia coli, pseudomonas aeruginosa y staphylococcus aureus 

      Hernández Cardona, Angie Katherine (Universidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá, Distrito CapitalBacteriología y Laboratorio Clínico, 2019-09)
      El uso indiscriminado de antibióticos convencionales usados en el tratamiento de infecciones causadas por microorganismos ha generado aumento en la tasa de resistencia bacteriana, esta problemática es considerada como una ...
    • Implementación del modelo para caracterización de Bacillus thuringiensis serovar neoleonensis (T24001) en el contexto de cáncer de cuello uterino 

      Camero Hernández, Silvia Fernanda (Universidad Colegio Mayor de CundinamarcaFacultad de Ciencias de la SaludBogotá D.C.,Bacteriología y Laboratorio Clínico, 2020)
      RESUMEN Varias cepas de la bacteria entomopatógena Bacillus thuringiensis han sido descritas con actividad citotóxica sobre células cancerosas en cultivo in vitro, incluyendo líneas HeLa, MOLT-4, y Jurkat entre otras. ...

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      • Caracterización bioquímica de Bacillus Thuringiensis Serovar Coreanensis 4al1 (t25001) en relación a su actividad hacia células cáncerigenas

        ...

        Estupiñán Torres, Sandra Mónica | 2020-06-02

        Las proteínas parasporina (PS) son sintetizadas en la fase de esporulación de Bacillus thuringiensis (Bt), una bacteria Gram positiva ampliamente estudiada por actividad insecticida debida a sus toxinas altamente específicas (proteínas Cry). Las PS son una clase de proteínas Cry, y tienen actividad citotóxica y especifica frente a células cancerosas, induciéndoles muerte celular por necrosis o apoptosis, además de poseer baja o nula actividad sobre las células con funcionamiento normal. Se han descrito varias cepas portadoras de actividad anticancerígena: Bt coreanensis, Bt dakota o Bt colmeri. En este trabajo se decidió caracterizar la cepa de Bt coreanensis 4AL1, en relación a posible actividad anticancerígena mediada por PS. Para este fin, se diseñaron oligonucleótidos específicos para cada uno de los grupos de PS (PS1, PS2, PS3, PS4, PS5, y PS6) registrados en Bacillus thuringiensis toxin nomenclature, tanto para identificar la presencia del gen como para su posterior aislamiento. En segunda instancia se estudió la cepa de Bt coreanensis 4AL1, en el contexto de analizar bioinformáticamente sus genomas en la búsqueda de genes codificantes de PS, y su caracterización bioquímica in silico, donde se determinó la presencia de un péptido relacionado con PS2Aa. Finalmente, se utilizó la cepa Bt coreanensis 4AL1, para obtener ADN genómico por método Hot Shot + Tween, la purificación de cristales posiblemente asociados a PS, y su determinación mediante SDS- PAGE, con presencia de una banda de 37 kDa que podría estar asociada a PS2Aa. Este 9 trabajo aporta a la caracterización de cepas de Bt, específicamente en el contexto de la síntesis de PS asociadas a control de cáncer.

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      • Determinación de la actividad antibacteriana de péptidos derivados de la secuencia rrwqwr de lactoferricina bovina

        ...

        Estupiñán Torres, Sandra Mónica | 2019-11

        La resistencia antibacteriana es un problema de salud pública y como posible solución, se han estudiado los péptidos antimicrobianos (PAMs) ya que estos, generan menos resistencia que los antibióticos convencionales. La Lactoferricina Bovina (LfcinB) es un PAM que ha demostrado tener gran actividad contra bacterias como: E. coli, P. aeruginosa y S. aureus, microrganismos que presentan altas tasas de resistencia frente a tratamientos convencionales, según la Organización Mundial de la Salud (OMS). En este trabajo se evaluó la actividad antibacteriana y hemolítica de péptidos monoméricos y polivalentes derivados de la LfcinB y sus análogos con sustituciones de Arg por Lys, contra cepas bacterianas ATCC, mediante la determinación de la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI), Concentración Mínima Bactericida (CMB), Curvas de Letalidad y porcentaje de hemólisis. Los péptidos con Lys que exhibieron mayor actividad antibacteriana fueron: el dímero (KKWQWK)2K-Ahx contra E. coli ATCC 25922 y P. aeruginosa ATCC 27853 (MIC 24 y 48 μM, respectivamente), y el tetrámero (KKWQWK)4K2-Ahx2-C2 contra S. aureus ATCC 25923 (MIC 47 μM). Para la cinética de muerte a las 48 horas, el péptido (KKWQWK)2K-Ahx presentó efecto bacteriostático contra a E. coli ATCC 25922 y bactericida contra P. aeruginosa ATCC 27853 y el péptido (KKWQWK)4K2-Ahx2-C2, efecto bactericida contra S. aureus ATCC 25923. Adicionalmente, se evidenció una disminución de la actividad hemolítica de los péptidos con Lys, de 2 a 7 veces comparados con los péptidos originales. Estos resultados indican que el cambio de Arg por Lys en péptidos derivados de LfcinB puede ser una estrategia para obtener moléculas promisorias a menores costos.

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      • Determinación de mecanismos de acción de péptidos frente a bacterias: revisión del estado del arte de las metodologías empleadas

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        Estupiñán Torres, Sandra Mónica | 2022

        En la última década, se ha trabajado en el hallazgo de nuevas moléculas peptídicas con actividad antibacteriana frente a microorganismos de importancia clínica actual, como lo son aquellos del grupo ESKAPE (Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa y Enterococcus spp.), causantes de enfermedades como la gastroenteritis, neumonía, endocarditis, infecciones intrahospitalarias e infecciones cutáneas. En esta revisión, se discute sobre los antecedentes, características y mecanismos de acción propuestos para los PAMs, por medio de una recopilación de diferentes artículos experimentales enfocados principalmente a las técnicas que han permitido la elucidación del mecanismo de acción, entre ellas se encuentran técnicas y ensayos como la microscopía de fluorescencia, microscopía electrónica, microscopía de fuerza atómica, ensayos moleculares e inmunoenzimáticos, entre otros. Estos ensayos han permitido avanzar en la comprensión e interpretación de la interacción de PAMs con los microorganismos lo que ayuda a diseñar mejoras en la estructura de los PAMs que puedan potenciar su actividad antibacteriana.

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      • Diagnóstico bacteriológico de la calidad del agua en la zona norte del Humedal La Vaca, Bogotá D.C, en dos épocas climáticas.

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        Estupiñán Torres, Sandra Mónica | 2019

        Los humedales son ecosistemas fundamentales, ya que son cuna de diversidad biológica, reducen las inundaciones y son grandes depósitos de carbono del planeta. El humedal La Vaca está ubicado en la localidad de Kennedy - Bogotá D.C y presenta una alta contaminación por desechos y vertimientos de aguas residuales. El objetivo de este proyecto fue evaluar la calidad bacteriológica del agua de la zona norte del humedal La Vaca, por medio de los microorganismos indicadores de contaminación (Coliformes totales, Escherichia coli, Enterococcus y Pseudomonas sp.), en dos épocas climáticas (seca y lluvia). La metodología se desarrolló en cuatro fases: elección y toma de muestra de diferentes puntos del humedal La Vaca teniendo en cuenta la NTC ISO 5667-2 de 1995, utilización del método de filtración por membrana, recuento de microorganismos indicadores de contaminación e identificación de los microorganismos aislados utilizando el sistema de identificación BBL Crystal. Finalmente se encontraron altos recuentos de todos los indicadores utilizados, por lo tanto, el agua del humedal La Vaca no es apta para la recreación activa; sin embargo puede ser utilizada para la recreación pasiva como: educación ambiental, miradores paisajísticos, observatorios de avifauna, toma de fotografías entre otros. Se debe agregar, que este trabajo fue socializado de manera didáctica al grupo de mujeres y niños guardianes del humedal la Vaca.

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      • Estudio de pseudomonas extremaustralis CMPUJ U515, Bacillus Subtilis ATCC 6633 y Bacillus Thuringiensis Kurstaki HD-1 en relación a estrés: Xenobióticos y Glifosfato

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        López Pazos, Silvio Alejandro | 2020-05

        Los xenobióticos son compuestos químicos no son naturales como fertilizantes, pesticidas, tintes, dioxinas, bifenilos policlorados o hidrocarburos poliaromáticos; contaminantes, afectan a los seres vivos porque no hacen parte de rutas metabólicas celulares, y son recalcitrantes. En la agricultura se usan xenobióticos como aldrin, dieldrina, endrina, Clordano, Heptacloro-Hexaclorobenceno, glifosato y DDT. Algunos microorganismos capaces de degradar xenobióticos son especies de Pseudomonas y Bacillus con potencial para biodegradación y biorremediación. P. extremaustralis, B. subtilis y B. thuringiensis poseen enzimas de uso biotecnológico. Hasta el 50% de las proteínas de su genoma se consideran hipotéticas de función desconocida, que pueden desempeñar funciones en procesos de adaptación. Este trabajo tiene como objetivo reconocer la posible presencia de proteínas de P. extremaustralis CMPUJ U515, B. subtilis ATCC6633 y B. thuringiensis kurstaki HD-1 que se expresan en condiciones de estrés, incluyendo degradación de xenobióticos. Haciendo uso de tBLASTn (E < 8e-17/ identidad >40% /cobertura >83%) se determinaron enzimas relacionadas con degradación de compuestos xenobióticos, igual que las enzimas glifosato oxidorreductasa o glicina oxidasa involucradas en la vía AMPA y la enzima fosfatasa específica C-P liasa las cuales están asociadas a la capacidad de tomar glifosato como única fuente de carbono o fosforo respectivamente. Las cepas se sometieron a estrés mediado por antibióticos para determinar la posible síntesis de proteínas de choque térmico GroEL/ES identificándose la posible síntesis de GroES (10 kDa). Este trabajo permite comprender mejor mecanismos por los cuales las bacterias se adaptan a ambientes de estrés y permiten identificar su potencial para Biotecnología ambiental.

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      • Evaluación de la actividad antibacteriana de péptidos sintéticos análogos de la buforina II contra escherichia coli, pseudomonas aeruginosa y staphylococcus aureus

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        Estupiñán Torres, Sandra Mónica | 2019-09

        El uso indiscriminado de antibióticos convencionales usados en el tratamiento de infecciones causadas por microorganismos ha generado aumento en la tasa de resistencia bacteriana, esta problemática es considerada como una amenaza creciente para la salud pública a nivel mundial1. La resistencia a los antibióticos (RA) se produce cuando las bacterias mutan en respuesta al uso inadecuado y/o innecesario de estos fármacos2. Dentro de este contexto, actualmente se buscan nuevas alternativas terapéuticas que mitiguen esta problemática. Entre estas opciones se encuentran los péptidos antimicrobianos (PAMs), los PAMs son importantes moléculas efectoras del sistema inmune innato, el cual es el principal mecanismo de defensa para la mayoría de los organismos vivos durante las etapas iniciales de infección bacteriana y han exhibido un amplio espectro de actividad antibacteriana que incluye bacterias Gram positivas como Gram negativas3. En la actualidad, hay más de 2000 secuencias peptídicas reportadas relacionadas a PAMs, son secuencias relativamente cortas, generalmente conformadas entre 10 a 50 aminoácidos3. Dentro de los PAMs, encontramos la Buforina II (BFII), péptido sintético derivado de la Buforina I (BFI), el cual se encuentra en el tejido estomacal del sapo asiático Bufo gargarizans. La BFII es un péptido de 21 aminoácidos, el cual ha exhibido mayor actividad antibacteriana que la BFI frente a cepas bacterias Gram positivas como Gram negativas4. En este trabajo se evaluó la actividad antibacteriana de 8 péptidos sintéticos lineales derivados del motivo mínimo antibacteriano de la BFII (32RLLR35), contra E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa ATCC 27853 y S. aureus ATCC 25923. Nuestros resultados permitieron identificar secuencias peptídicas con amplio espectro de actividad cuyas concentraciones mínimas inhibitorias (CMIs) variaron en un rango de concentración de 38 μM a 259 μM. De manera general los péptidos palindrómicos presentaron mejor actividad frente a las cepas evaluadas. Los resultados de este trabajo sugieren que la incorporación de Cys y Ahx sobre secuencias palindrómicas derivadas de la BFII incrementan la actividad antibacteriana.

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      • Implementación del modelo para caracterización de Bacillus thuringiensis serovar neoleonensis (T24001) en el contexto de cáncer de cuello uterino

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        López Pazos, Silvio Alejandro | 2020

        RESUMEN Varias cepas de la bacteria entomopatógena Bacillus thuringiensis han sido descritas con actividad citotóxica sobre células cancerosas en cultivo in vitro, incluyendo líneas HeLa, MOLT-4, y Jurkat entre otras. Esta actividad se ha asociado a una clase de proteínas denominadas parasporinas (PS), las cuales pertenecen al grupo de proteínas insecticidas Cry, Estas PS generan apoptosis en células cancerígenas. En este proyecto se implementó un modelo in vitro para cultivo de células de cáncer de cuello uterino, junto con la caracterización de la cepa B. thuringiensis serovar neoleonensis (T24001), que tiene actividad citotóxica contra la línea tumoral de células T de leucemia (MOLT-4). Con esto en mente, la cepa de trabajo se caracterizó por microscopia de luz y de contraste de fases, se le realizó prueba de sensibilidad a antibióticos (ampicilina, tetraciclina y gentamicina), y finalmente se extrajo purificó cristales parasporales de B. thuringiensis serovar neoleonensis (T24001), los cuales se cuantificaron mediante el método de Bradford, luego se determinó presencia de las proteínas correspondientes en electroforesis en gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), y poder visualizar la presencia de posibles PS. Para el cultivo de células de cáncer de cuello uterino se usaron las líneas HeLa y SiHa provenientes de tejido tumoral de cáncer de cuello uterino, con el fin de obtener un modelo estable, constante y reproducible, donde se utilizaron viales que contenían las células en medio de congelación (suero fetal bovino + dimetil sulfuro), las cuales se cultivaron en medio DMEM-High y se incubaron a 37°C en atmosfera de CO2. Estas células se observaron desde las 24 horas con microscopio invertido para determinar confluencia celular de 90%, óptima para ensayos de viabilidad celular mediante el ensayo Tripan Blue, encontrando que las células HeLa son más resistentes a la manipulación que las células SiHa, al utilizar concentraciones celulares conocidas desde 5000 células/ml hasta 40000 células/ml en pruebas de cuatro días, que sean útiles para futuros ensayos de 10 citotoxicidad. Este trabajo aporta al área de determinación de PS como posible agente anticancerígeno gracias a su actividad específica contra células tumorales, y su inocuidad hacia células de tejidos sanas.

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